NY_T 2859-2015 主要农作物品种真实性SSR分子标记检测 普通小麦

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ICS 65.020.01,B 04 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 2859—2015,主要农作物品种真实性SSR,分子标记检测普通小麦,Variety genuineness testing of main crops with SSR markers-,Wheat (Triticum aestivum L.),201570-09 发布 2015-12-01 实施,中华人民共和国农业部发布,ny/t 2859—2015,目 次,前言. n,范围.. 1,2规范性引用文件 1,3术语和定义. 1,4缩略语. 1,5 总贝!]. 2,6检测方案.. 2,7仪器设备、试剂和溶液配制 5,8真实性检测程序 6,9结果计算与表示 9,10结果报告. 10,附录A(规范性附录)溶液配制 11,附录B(资料性附录)引物分组信息.. 13,附录C(规范性附录)等位变异扩增片段信息 .. 14,附录D(资料性附录)参照样品名单.. 23,I,ny/t 2859—2015,* ?—1—,刖 s,本标准按照GB/T 1. 1—2009给出的规则起草,请注意本标准的某些内容有可能涉及专利。本标准的发布机构不应承担识别这些专利的责任,本标准由农业部种子管理局提出,本标准由全国农作物种子标准化技术委员会(SAC/TC 37)归口,本标准起草单位:北京市农林科学院北京杂交小麦工程技术研究中心、全国农业技术推广服务中,心、北京市种子管理站,本标准主要起草人:赵昌平、支巨振、邱军、庞斌双、刘丽华、王立新、谷铁城、刘丰泽、吴明生、刘阳,娜、张立平、张风廷、李宏博、赵海艳,n,NY/T 2859—2015,主要农作物品种真实性SSR分子标记检测 普通小麦,1范围,本标准规定了利用SSR分子标记法进行普通小麦(7>〃储“加aestivum L.)常规品种真实性检测的,原则、检测方案、检测程序和结果报告,本标准适用于普通小麦常规品种真实性验证和品种真实性身份鉴定,不适用于实质性派生品种,(EDV)和转基因品种的鉴定,2规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文,件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件,GB/T 3543. 1农作物种子检验规程总则,GB/T 3543.2农作物种子检验规程杆样,GB/T 3543.5农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定,GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法,3术语和定义,下列术语和定义适用于本文件,3.1,品种真实性验证 variety verification,与其对应品种名称的标准样品比较,检测证实供检样品品种名称与标注是否相符,3.2,品种真实性身份鉴定variety identification,经SSR分子标记检测并通过审定品种SSR指纹数据比对平台(见3. 4)筛查比较,确定供检样品的,真实品种名称,3.3,标准样品 standard sample,国家指定机构保存的经认定代表品种特征特性的实物种子样品,3.4,SSR 指纹数据比对平台 SSR fingerprint blast platform,采用SSR标记的标准化方法对品种标准样品的等位变异进行检测,并运用计算机数据库技术和网,络信息技术所构建的审定品种分子数据信息的检索比对载体,3.5,参照样品 reference control sample,用于校准供检样品SSR等位变异已定义扩增产物片段大小的样品,3.6,引物primer,一条互补结合在模板DNA链上的短单链,能提供3'- OH末端作为DNA合成的起始点,延伸合成,模板DNA的互补链,1,NY/T 2859—2015,3.7,组合引物panel,具有不同荧光颜色或相同荧光颜色而扩增片段大小不同、能够组合在ー起进行电泳的ー组荧光标,记引物,3.8,核心引物core primer,以最少数量的引物最大限度地区分普通小麦品种的一套引物,3.9,扩展引物 extended primer,辅助真实性检测的ー套引物,4缩略语,下列缩略语适用于本文件,bp:base pair 碱基对,CTAB: cetyltrimethylammonium bromide 十六烷基三甲基澳化钱,DNA: deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸,dNTPs : deoxy-ribonucleoside triphosphates 脱氧核昔三磷酸,PAGE:polyacrylamide gelelectrophoresis 聚丙烯酰胺凝胶电泳,PCR : polymerase chain reaction 聚合酶链式反应,SDS: sodium dodecyl sulfate 十二烷基磺酸钠,SSR: simple sequence repeat 简单序列重复,Taq 酶:Taq - DNA polymerase 耐热 DNA 聚合酶,5总则,普通小麦的不同品种,其基因组存在着能够世代稳定遗传的简单重复序列(SSR)的重复次数差异,这种差异可以通过从抽取有代表性的供检样品中提取DNA,用SSR引物进行扩增和电泳,从而利用扩,增片段大小不同而加以区分品种,依据SSR标记检测原理,采用固定数目的SSR引物,通过与标准样品比较或与SSR指纹数据比对,平台比对的方式,对品种真实性进行验证或身份鉴定。真实性验证依据规定数目引物的SSR位点差异,数目而判定,品种真实性身份鉴定依据被检SSR位点无差异原则进行筛查、鉴定,6检测方案,6. 1总则,对于真实性鉴定,引物、检……

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